Removal Of Lead Citrate and Uranyl Acetate Precipitates on L.R. White Sections

介绍

LR White（EMS 目录号#14380）是一种亲水性包埋剂，可使水溶液轻松通过薄片。消除醋酸双氧铀沉淀物的常规方法（Hayat，1986）建议用 0.5% 的羟基酸处理切片 12 秒，用 10% 的乙酸处理 1 分钟，或用 2% 的水溶液（或乙醇）溶液（EMS 目录号 #22400）醋酸双氧铀 1 分钟。通过用 2% 醋酸双氧铀水溶液处理 2-8 分钟来消除铅沉淀物。室温或 10% 醋酸水溶液 1-5 分钟。不幸的是，这些方法可能会破坏 LR White 部分的连续性。

我们的实验室修改了 Hayat 的传统方法，以避免或消除 LR White 切片在电子束下之前和之后的染色沉淀，同时保持切片完整。

材料和讨论

我们的首要目标是防止染色过程中形成染色沉淀。温热的蒸馏水用于网格的最后冲洗，以避免醋酸双氧铀沉淀。在染色过程中将 10 毫升的蒸馏水烧杯放入固化炉 (50°C) 中，并在漂洗步骤之前取出使用。为避免染色过程中铅沉淀，在 10ml 蒸馏水中加入一粒氢氧化钠。用铅染色，在溶液中浸一次，然后用蒸馏水清洗。

我们通过将网格浸入 0.25% 过滤的草酸中，成功地从 LR White 嵌入切片中去除了醋酸铀酰和铅盐。保留部分比原始染色时间长 3-4 倍。这种方法已在我们实验室中用于长时间曝光（30 分钟或更长时间）的未在电子束下的切片。